PCR实验室设计必须设计走廊吗?

PCR实验室又称为基因扩增实验室,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别,精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。

PCR实验室设计
PCR实验室设计

一、PCR实验室基本结构    

PCR实验室基本由四大结构组成,常见为:试剂准备区、制备区、扩增区和扩增分析区。

二、基本功能介绍:

1、准备区:主要进行实验所需试剂的准备工作,分装等,由传递窗运送至制备区,严禁走人员通道。

2、制备区:主要进行样品等保存,DNA/RNA的提取、贮存和其加入至扩增反应管和测定DNA/RNA的合成。

3、扩增区:主要进行DNA的扩增,已制备的DNA模版和合成的cDNA的加入和主板反应混合液制备成反应混合液等也可在扩增区内进行,在巢式PCR测定中,通常在首次扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高等污染危害性,二次加样必须在本区完成。

4、扩增分析:主要用来做扩增产物的测定,本区是主要的扩增产物污染来源,因此必须主意避免通过本区的物品或者工作服将扩增产物带出。

三、PCR实验室的走廊、传递窗设计常识  

1. PCR走廊:并不是标配,进深不够时不要做PCR走廊,且PCR走廊会增加交叉污染。    

这4个分区(试剂储存和准备区、标本制备区、核算扩增区、产物分析区)原本就不需连接在一起。且在物理空间上必须是完全相互独立的,各区域无论在空间上还是在使用中,应当始终处于完全的分隔状态,不能有空气的直接相通。

2. 传递窗:并非必须设置(只要不涉及洁/污分流就不需要设置传递窗),但一般实验机构/实验人员喜欢设置。

传递窗的本质同缓冲间,是物流的缓冲间。在PCR实验室设计中,试剂准备和标本制备间是重点保护的区域,此处最好不要加传递窗,防止交叉污染。实验中的污染风险主要来自于核酸扩增时的加样行为,但由于操作在生物安全柜内进行,且确保空气不外溢,因此不存在污染。

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